SOBRE NUESTRAS TÉCNICAS

Cada panel está diseñado específicamente según la especie, el cuadro clínico, la edad, y la fase productiva, facilitando un diagnóstico diferencial más completo y adaptado a las enfermedades infecciosas que afectan a los animales de producción.

Diagnóstico más completo

Estudiamos de forma simultánea los principales agentes infecciosos asociados a un mismo proceso clínico, ayudando a identificar infecciones simples y coinfecciones.

Adaptados a cada caso

Los paneles se diseñan teniendo en cuenta la especie, la edad o fase productiva y el proceso clínico, seleccionando los patógenos más relevantes en cada situación.

Optimización de costes y muestras

A partir de una misma muestra podemos analizar diferentes patógenos mediante qPCR, optimizando el uso del material recibido y reduciendo el coste frente a la realización de múltiples análisis independientes.

Resultados rápidos

La automatización del proceso y el análisis mediante PCR en tiempo real permiten obtener resultados con rapidez, facilitando la toma de decisiones en granja.

Esta información resulta especialmente útil para realizar estudios epidemiológicos, determinar genotipos, identificar variantes y serotipos de mayor relevancia, diferenciar cepas y analizar la relación entre microorganismos procedentes de distintos animales, explotaciones o brotes.

Caracterizar virus y bacterias

Identificamos genotipos, variantes, serotipos y otros marcadores genéticos que permiten caracterizar con mayor precisión los microorganismos presentes en una muestra.

Estudiar la relación entre cepas

La comparación de secuencias y perfiles genéticos permite valorar el grado de similitud entre microorganismos aislados en diferentes animales, lotes, explotaciones o episodios clínicos.

Realizar estudios epidemiológicos

La caracterización molecular ayuda a investigar la circulación de los agentes infecciosos, establecer posibles relaciones entre brotes y estudiar la trazabilidad de las cepas presentes en una explotación o población animal.

Tipificar cepas bacterianas

Aplicamos técnicas como MLST (Multilocus Sequence Typing) y MLVA (Multiple-Locus Variable-number Tandem Repeat Analysis) para diferenciar y clasificar cepas bacterianas en función de sus perfiles genéticos.

Según el objetivo diagnóstico, utilizamos técnicas de secuenciación Sanger, secuenciación por nanoporos y métodos de tipificación molecular, complementados con qPCR cuando se requiere la identificación dirigida de genotipos o variantes concretas.

Secuenciación Sanger

Permite obtener la secuencia de regiones específicas del genoma con una elevada precisión. Es especialmente útil para la identificación y caracterización de regiones acotadas del genoma de microorganismos, la confirmación de variantes y el estudio de genes concretos.

Secuenciación de tercera generación a través de nanoporos

La tecnología de secuenciación por nanoporos permite la obtención de secuencias de ADN o ARN que facilita estudios de caracterización y epidemiología molecular.

Tras la extracción del ADN o ARN de la muestra, se amplifica una región específica del genoma del patógeno, lo que permite detectar la presencia del agente en tiempo real con una elevada sensibilidad y especificidad.

En los patógenos cuyo material genético es ARN se realiza previamente una transcripción reversa, dando lugar a la técnica RT-qPCR (Reverse Transcription quantitative PCR).

Detección e identificación

La qPCR permite detectar de forma específica el material genético de un patógeno incluso cuando está presente en cantidades reducidas.

Al trabajar directamente sobre la muestra, facilita un diagnóstico rápido de enfermedades infecciosas sin depender del aislamiento o cultivo previo del microorganismo.

Estimación de la carga del patógeno

El valor Cq (Quantification Cycle), también denominado Ct (Cycle Threshold o Threshold Cycle), corresponde al ciclo de amplificación en el que la señal fluorescente supera el umbral establecido por el ensayo.

En términos generales, cuanto menor es el valor Cq/Ct, mayor es la cantidad de material genético del patógeno presente en la muestra.

Este valor puede aportar información adicional para interpretar el resultado dentro del contexto clínico y epidemiológico, teniendo siempre en cuenta el tipo de muestra, el patógeno analizado y las características del ensayo.

Caracterización y tipificación molecular

Mediante ensayos de qPCR específicos podemos detectar genes de virulencia, toxinas, identificar serotipos, genotipos, mutaciones o variantes concretas.

Esta caracterización aporta información inmediata sobre el agente detectado y puede ayudar a orientar medidas de prevención y control, así como la selección y caracterización de aislados destinados a otros estudios.

Diferenciación entre cepas vacunales y de campo

Cuando existen marcadores genéticos específicos, podemos utilizar ensayos de qPCR para diferenciar cepas vacunales de cepas de campo.

Esta información resulta especialmente útil en programas de vacunación, investigaciones epidemiológicas y en la interpretación de resultados positivos tras la administración de determinadas vacunas.

1. Preparación de la muestra

Seleccionamos y procesamos la muestra adecuada según el patógeno y el proceso clínico que queremos investigar.

2. Extracción de ácidos nucleicos

Extraemos y purificamos el ADN o ARN presente en la muestra.

3. Amplificación específica

Utilizamos cebadores y sondas diseñados para reconocer regiones concretas del genoma del patógeno.

4. Detección en tiempo real

El equipo registra la fluorescencia generada durante cada ciclo de amplificación y determina el valor Cq/Ct.

5. Interpretación del resultado

El resultado se interpreta conjuntamente con los resultados, teniendo en cuenta los controles del ensayo, el valor Cq/Ct, el tipo de muestra y el contexto clínico y epidemiológico.

• Confirmar la presencia y viabilidad de una bacteria implicada en el proceso clínico.
• Obtener la cepa bacteriana para realizar estudios posteriores.
• Seleccionar los aislamientos bacterianos destinados a la elaboración de autovacunas.
• Realizar estudios de sensibilidad antimicrobiana.
• Conservar cepas de interés para I+D.

Selección de la muestra

Seleccionamos y procesamos las muestras más adecuadas según la especie animal, el proceso clínico y las bacterias que queremos investigar.

Cultivo en medios específicos

Sembramos las muestras en medios de cultivo adaptados a los requerimientos de cada bacteria, incluyendo condiciones específicas para el crecimiento de bacterias aerobias y anaerobias.

Cuando es necesario, utilizamos medios o etapas de preenriquecimiento que favorecen la recuperación de bacterias presentes en baja concentración o con requerimientos especiales de crecimiento.

Identificación bacteriana

Una vez obtenido un cultivo puro a partir de una única colonia aislada, realizamos su identificación mediante MALDI-TOF por espectrometría de masas.

MALDI-TOF MS (Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Time-of-Flight Mass Spectrometry) es una técnica de espectrometría de masas que permite identificar bacterias a partir de su perfil proteico característico.

Una pequeña cantidad de la cepa bacteriana aislada se deposita sobre la placa del equipo. El MALDI-TOF genera el espectro de masas característico del microorganismo y lo compara automáticamente con una amplia base de datos de referencia para determinar su identidad.

En la mayoría de los casos, esta tecnología permite alcanzar una identificación a nivel de género y especie.

Identificación rápida

Una vez aislada la bacteria, la identificación mediante MALDI-TOF puede realizarse en pocos minutos.

Alta capacidad de identificación

Permite identificar numerosas especies bacterianas de interés veterinario mediante una única tecnología.

Identificación precisa y objetiva

La comparación del perfil proteico con espectros de referencia proporciona una identificación fiable cuando el microorganismo está correctamente representado en la base de datos.

Facilita estudios posteriores

Una identificación precisa del aislado permite seleccionar las pruebas complementarias más adecuadas, como estudios de sensibilidad antimicrobiana, caracterización molecular o selección de cepas para autovacunas.

Es una herramienta especialmente útil en ganadería para conocer el contacto previo con determinados patógenos, estudiar la circulación de enfermedades en una explotación y realizar el seguimiento sanitario de animales, lotes o rebaños.

Trabajamos con kits comerciales de referencia y técnicas inmunológicas validadas, seleccionadas según la especie animal y el agente que se desea investigar.

Detección de anticuerpos

Permite identificar anticuerpos específicos frente a diferentes agentes infecciosos y conocer si el animal ha estado en contacto con estos patógenos y ha desarrollado una respuesta inmunitaria frente a ellos.

Monitorización de rebaños

El análisis de animales individuales o grupos permite estudiar la seroprevalencia y la circulación de patógenos dentro de una explotación, facilitando el seguimiento de los programas sanitarios.

Perfiles serológicos

En determinados casos podemos diseñar perfiles serológicos adaptados al objetivo del estudio, seleccionando animales, lotes o grupos de edad representativos.

Estos perfiles permiten investigar situaciones concretas, comparar diferentes grupos dentro de una explotación y estudiar la evolución serológica de un rebaño a lo largo del tiempo, aportando información útil para valorar cambios en la exposición, la circulación de agentes infecciosos o la respuesta frente a programas de control y vacunación.

Evaluación de programas vacunales

En determinadas enfermedades, la serología puede utilizarse para valorar la respuesta inmunitaria tras la vacunación y realizar un seguimiento de la inmunidad a nivel de lote o rebaño.

Estudios epidemiológicos

Los perfiles serológicos ayudan a conocer la exposición de una población a determinados agentes infecciosos y a estudiar su evolución a lo largo del tiempo.

ELISA

El enzimoinmunoanálisis de absorción (ELISA) permite detectar y, dependiendo del ensayo, estimar la cantidad de anticuerpos específicos presentes en la muestra.

Es una técnica ampliamente utilizada en diagnóstico veterinario por su sensibilidad, reproducibilidad y capacidad para analizar un elevado número de muestras.

Aglutinación

Las técnicas de aglutinación detectan la reacción entre anticuerpos específicos y sus correspondientes antígenos, generando una aglutinación visible que permite determinar la presencia de anticuerpos frente al agente estudiado.

Inmunofluorescencia

La inmunofluorescencia permite detectar anticuerpos mediante la unión específica a antígenos y su visualización utilizando marcadores fluorescentes.

La presencia de anticuerpos indica que el sistema inmunitario ha estado en contacto con un determinado antígeno, pero no siempre significa que exista una infección activa en el momento del análisis.

La interpretación debe realizarse teniendo en cuenta factores como la edad del animal, el estado vacunal, el momento de la toma de muestra, la presencia de anticuerpos maternales, la epidemiología de la explotación y las características de cada enfermedad.

Cuando es necesario, la serología puede complementarse con técnicas de diagnóstico directo como la qPCR o el cultivo microbiológico para obtener una visión más completa del proceso clínico.

Mediante técnicas de cromatografía líquida de alta resolución (HPLC y UHPLC) podemos investigar sospechas de intoxicación y analizar compuestos de interés toxicológico en matrices complejas.

Análisis toxicológicos

Realizamos análisis dirigidos a la detección, identificación y cuantificación de sustancias tóxicas ante una sospecha de intoxicación o envenenamiento.

La selección del análisis y de la muestra más adecuada depende de la sustancia sospechosa, la especie animal, la sintomatología y las circunstancias del caso.

Micotoxinas

Analizamos micotoxinas de relevancia en sanidad y producción animal. Las micotoxinas son compuestos tóxicos producidos por determinados hongos que pueden contaminar materias primas y alimentos.

Su detección y cuantificación ayuda a valorar la posible exposición de los animales y su relación con problemas sanitarios o productivos.

La HPLC (High-Performance Liquid Chromatography) o cromatografía líquida de alta resolución es una técnica analítica que permite separar los diferentes compuestos presentes en una muestra para posteriormente detectarlos, identificarlos y cuantificarlos.

1. Preparación de la muestra

La muestra se procesa para extraer los compuestos de interés y reducir posibles interferencias propias de la matriz.

2. Separación cromatográfica

La muestra se introduce en el sistema cromatográfico, donde sus componentes se separan en función de sus propiedades fisicoquímicas y de su interacción con las fases móvil y estacionaria.

3. Detección e identificación

Los compuestos separados son detectados mediante el sistema analítico correspondiente y se identifican utilizando parámetros y estándares de referencia.

4. Cuantificación

Cuando el análisis lo permite, determinamos la concentración del compuesto detectado para valorar el nivel de exposición presente en la muestra.

La UHPLC (Ultra-High-Performance Liquid Chromatography) es una evolución de la cromatografía líquida de alta resolución que trabaja con sistemas capaces de ofrecer una separación cromatográfica más eficiente.

Esta tecnología permite obtener mayor resolución, sensibilidad y rapidez de análisis, facilitando la detección y cuantificación de compuestos presentes en matrices complejas y a bajas concentraciones.

Además de su utilidad en casos clínicos individuales, en animales de producción son una herramienta muy útil para monitorizar lotes y rebaños, detectar alteraciones subclínicas y estudiar su relación con el manejo, la alimentación y el rendimiento productivo.

Evaluación del estado sanitario

Permiten valorar el estado general de los animales y detectar alteraciones que pueden estar relacionadas con procesos infecciosos, inflamatorios, metabólicos o nutricionales.

Detección de procesos subclínicos

Determinados cambios hematológicos o bioquímicos pueden aparecer antes de que existan signos clínicos evidentes, ayudando a identificar problemas sanitarios en fases tempranas.

Seguimiento de lotes y rebaños

El análisis de grupos representativos permite estudiar la evolución de una población y relacionar determinados parámetros con su estado sanitario y rendimiento productivo.

Evaluación de cambios y tratamientos

Los perfiles sanguíneos pueden utilizarse para valorar la evolución de los animales tras un tratamiento o después de introducir cambios en el manejo, alimentación o condiciones de la explotación.

Estudios comparativos

Permiten comparar grupos sometidos a diferentes dietas, aditivos, manejos, condiciones ambientales o líneas genéticas, proporcionando indicadores objetivos de su respuesta fisiológica.

BIOQUÍMICA

La bioquímica sanguínea permite medir diferentes sustancias presentes principalmente en suero o plasma y obtener información sobre el funcionamiento de distintos órganos y procesos metabólicos. Entre otros parámetros, podemos evaluar:

• Metabolitos y productos de excreción, relacionados con diferentes procesos metabólicos y con la función de determinados órganos.
• Enzimas, cuyas variaciones pueden estar asociadas a lesión o alteración celular y tisular.
• Proteínas y otros componentes sanguíneos, relacionados con el estado metabólico, nutricional o inflamatorio.
• Nutrientes y minerales, útiles para valorar el estado nutricional y determinados desequilibrios metabólicos.

La selección de los parámetros puede adaptarse al objetivo clínico, productivo o experimental de cada caso.

HEMATOLOGÍA

La hematología veterinaria estudia las células presentes en la sangre y sus principales características mediante la realización de un hemograma.

Serie roja

Evaluamos los eritrocitos o glóbulos rojos y parámetros relacionados con ellos, proporcionando información útil para detectar y caracterizar alteraciones como las anemias o cambios en la concentración de células sanguíneas.

Serie blanca

Estudiamos los leucocitos o glóbulos blancos, tanto su número total como su distribución, aportando información sobre la respuesta inmunitaria y sobre posibles procesos inflamatorios o infecciosos.

Serie plaquetaria

Valoramos las plaquetas y los parámetros asociados, esenciales en los mecanismos de hemostasia y coagulación.

Los resultados deben interpretarse teniendo en cuenta la especie, edad, fase productiva, estado fisiológico, alimentación y situación clínica de los animales.

En estudios de granja, la evaluación conjunta de varios animales y su evolución en el tiempo puede aportar más información que un resultado aislado, ayudando a detectar tendencias y comparar grupos dentro de una misma población.